Ahoana no hamaritana ny fifantohana tsara indrindra?
Ho an'ny IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside), arakaraka ny maha-avo ny fifantohana no tsara kokoa. Miankina amin'ny fepetra manokana amin'ny fanandramana sy ny vokatra induction irina ny fifantohana tsara indrindra.
Amin'ny ankapobeny, ny fifantohana IPTG dia ampiasaina eo anelanelan'ny 0.1-1 mM. Ny fifantohana ambany kokoa dia afaka mampihena ny voka-dratsy eo amin'ny fitomboan'ny sela ary mety hampihena ny cytotoxicity vokatry ny fihoaram-pefy ataon'ny proteinina kendrena. Ny fifantohana ambony kokoa dia mety hiteraka enta-mavesatra be loatra amin'ny metabolisman'ny sela, izay misy fiantraikany amin'ny fitomboan'ny sela sy ny fahombiazan'ny fanehoana azy.
Ny fomba hamaritana ny fifantohana tsara indrindra dia ny fanombanana ny haavon'ny fanehoana ny proteinina kendrena amin'ny alàlan'ny fanaovana fitsapana famporisihana IPTG amin'ny fifantohana samihafa. Ny fitsapana kolontsaina kely dia azo atao amin'ny alàlan'ny fampiasana fifantohana IPTG isan-karazany (oh: 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, sns.) ary ny vokatry ny fanehoana amin'ny fifantohana samihafa dia azo tombanana amin'ny alàlan'ny famantarana ny haavon'ny fanehoana ny proteinina kendrena (oh: Western blot na fluorescence detection). Araka ny valin'ny fanandramana, ny fifantohana misy ny vokatry ny fanehoana tsara indrindra no nofidina ho fifantohana tsara indrindra.
Ankoatra izany, azonao atao ihany koa ny mijery ireo literatiora mifandraika amin'izany na ny traikefan'ny laboratoara hafa mba hahatakarana ny tahan'ny fifantohana IPTG ampiasaina matetika amin'ny toe-javatra mitovy amin'izany, ary avy eo dia manatsara sy manitsy araka ny filàna amin'ny fanandramana.
Zava-dehibe ny manamarika fa mety miovaova arakaraka ny rafitra fanehoana samihafa, ny proteinina kendrena ary ny fepetra andrana ny fifantohana tsara indrindra, noho izany dia tsara kokoa ny manatsara izany isaky ny tranga.
Fotoana fandefasana: 28 Septambra 2023