Maro ireo maherifo tsy dia fantatra loatra manodidina antsika, izay toa tsotra fotsiny, nefa raha ny marina dia mandray anjara betsaka amintsika mangina izy ireo. Ny Proteinase K no "maherifo tsy dia fantatra loatra" eo amin'ny sehatry ny diagnostika molekiola, na dia raha ampitahaina amin'ireo "lehibe sy mahery" eo amin'ny sehatry ny indostria aza, dia ambany dia ambany ny proteinase K ka tsy noraharahaintsika ela ny maha-zava-dehibe azy. Noho ny fihanaky ny valanaretina vaovao, dia nitombo be ny fangatahana proteinase K, ary ny famatsiana ao an-toerana sy any ivelany dia lavitra noho ny fanjifana, ary tampoka teo dia takatry ny rehetra fa tena zava-dehibe ny proteinase K.
Inona no fampiasana ny proteinina K?
Ny Proteinase K dia protease serine manana asa anzima proteolytika ary afaka mitazona ny asany amin'ny tontolo iainana isan-karazany (pH (4-12.5), buffer sira be, mari-pana avo 70°C, sns.). Ankoatra izany, ny asan'ny proteinase K dia tsy voasakan'ny SDS, urea, EDTA, guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, sns., ary ny savony kely dia afaka mampitombo ny asan'ny proteinase K ihany koa. Amin'ny fitsaboana ara-pitsaboana (fanadiovana viriosy sy mikraoba), sakafo (fanalefahana hena), hoditra (fanalefahana volo), fanaovana divay (fanadiovana alikaola), fanomanana asidra amine (volo simba), fitrandrahana asidra nokleika, hybridization in situ, sns., ny proteinase K dia misy fampiharana maro. Ny fampiharana ampiasaina matetika indrindra dia ny fitrandrahana asidra nokleika.
Afaka manova ny karazana proteinina rehetra ao amin'ny santionany ny Proteinase K, anisan'izany ireo histones izay mifamatotra mafy amin'ny asidra nokleika, mba hahafahan'ny asidra nokleika mivoaka avy ao amin'ny santionany ary mivoaka ao amin'ny fitrandrahana, ka manamora ny dingana manaraka amin'ny fitrandrahana sy fanadiovana. Amin'ny fitadiavana asidra nokleika viraliny, ny proteinase K dia iray amin'ireo singa manan-danja ao amin'ny vahaolana fakana santionany viriosy. Ny Proteinase K dia afaka mamaky sy manafoana ny proteinina fonosin'ny viriosy, izay azo antoka kokoa mandritra ny dingana fitaterana sy ny fitadiavana; ankoatra izany, ny proteinase K dia afaka manimba ny RNase ihany koa, misoroka ny fahasimban'ny RNA viraliny ary manamora ny fitadiavana asidra nokleika.
Ny lazan'ny proteinase K nandritra ny alina
Na eo amin'ny sehatry ny fikarohana siantifika na eo amin'ny sehatry ny IVD, ny fitrandrahana asidra nokleika no fanandramana fototra indrindra, ka ny proteinase K dia efa nisy foana. Na izany aza, taloha, ny proteinase K dia tsy dia fantatra loatra raha oharina amin'ny anjara asany. Ny ampahany betsaka amin'izany dia satria ny fifandraisan'ny famatsiana sy ny fangatahana an'ny proteinase K dia tena marin-toerana. Vitsy ny olona hieritreritra fa ho olana ny famatsiana ny proteinase K.
Niakatra be ny fangatahana fitiliana asidra nokleika noho ny fihanaky ny valanaretina vaovao momba ny satroboninahitra. Tamin'ny faramparan'ny volana Jona 2020, efa ho 90 tapitrisa ny fitiliana satroboninahitra vaovao vitan'i Shina, ary vao mainka mampanahy kokoa io isa io amin'ny sehatra manerantany. Amin'ny andrana fitrandrahana asidra nokleika, eo amin'ny 50-200 μg/mL eo ho eo ny fifantohana miasa amin'ny proteinase K. Amin'ny ankapobeny, mila 100 μg eo ho eo ny proteinase K mba hahazoana santionany asidra nokleika. Amin'ny fampiasana tena izy, mba hampitomboana ny fahombiazan'ny fitrandrahana asidra nokleika, matetika ny Proteinase K dia ampiasaina amin'ny habetsahana bebe kokoa. Ny fitadiavana asidra nokleika amin'ny coronavirus vaovao dia nitondra fangatahana proteinina K betsaka. Tapaka haingana ny fifandanjana tany am-boalohany amin'ny famatsiana sy ny fangatahana ny proteinase K, ary lasa fitaovana fisorohana ny valanaretina manan-danja ny proteinase K tao anatin'ny indray mipi-maso.
Fahasarotana amin'ny famokarana proteinase K
Na dia efa nohajain'ny olona aza ny lanjan'ny proteinase K noho ny fivoaran'ny valanaretina, dia mahamenatra fa noho ny tsy fahampian'ny proteinase K dia vitsy ny orinasa eto an-toerana no nandray anjara tamin'ny famokarana proteinase K. Rehefa te-hametraka ny famokarana proteinase K ny olona Nandritra ny dingana famokarana dia hita fa proteinina tena miavaka ny proteinase K. Tena sarotra ny manitatra ny fahafaha-mamokatra ny proteinase K ao anatin'ny fotoana fohy.
Ireto avy ireo olana atrehin'ny famokarana betsaka ny proteinase K:
1. Fisehoana ambany
Afaka manimba ny ankamaroan'ny proteinina amin'ny fomba tsy manokana ny Proteinase K ary miteraka poizina mafy ho an'ny sela mpampiantrano. Noho izany, amin'ny ankapobeny dia ambany dia ambany ny haavon'ny fanehoana ny Proteinase K. Ny fandinihana ireo rafitra fanehoana sy ireo karazana izay maneho betsaka ny Proteinase K dia matetika mitaky tsingerina lava kokoa.
2. Sisa tavela amin'ny loko sy asidra nokleika
Ny fermentation amin'ny ambaratonga lehibe dia mampiditra loko sy asidra nokleika betsaka. Sarotra ny manala ireo loto ireo amin'ny dingana fanadiovana tsotra, ary ny fanadiovana sarotra dia mampitombo ny vidiny ary mampihena ny tahan'ny famerenana amin'ny laoniny.
3. Tsy fandriam-pahalemana
Tsy dia marin-toerana loatra ny Proteinase K, afaka manova ny tenany ho anzima izy, ary sarotra ny mitahiry azy amin'ny fomba marin-toerana amin'ny mari-pana 37°C mandritra ny fotoana maharitra raha tsy misy akora miaro.
4. Mora mivaingana
Rehefa manomana ny vovoka proteinase K maina mangatsiaka, mba hahazoana antoka fa betsaka ny votoatin'ny proteinina K ao anaty vovoka maina mangatsiaka, dia ilaina ny manampy akora fiarovana maina mangatsiaka amin'ny fifantohana avo, fa rehefa mahatratra 20mg/mL na mihoatra ny fifantohana ny proteinase K, dia mora ny miangona ka mamorona vongan-javatra, izay miteraka fahasarotana lehibe amin'ny maina mangatsiaka ny proteinase K izay misy votoatin'ny zavatra mafy orina.
5. Fampiasam-bola lehibe
Manana fiasan'ny protease matanjaka ny Proteinase K ary afaka manadio ireo protease hafa ao amin'ny laboratoara. Noho izany, ny proteinase K dia mitaky sehatra famokarana manokana, fitaovana ary mpiasa ho an'ny fikarohana sy ny fampandrosoana ary ny famokarana.
Vahaolana proteinase K an'ny XD BIOCHEM
Manana sehatra matotra amin'ny fanehoana sy fanadiovana proteinina ny XD BIOCHEM, ary manana traikefa manankarena amin'ny fanehoana sy fanadiovana proteinina recombinant sy ny fanatsarana ny fizotran'ny famokarana. Noho ny fananganana haingana ny ekipa mpikaroka sy fampandrosoana, dia resy ny fizotran'ny famokarana proteinase K amin'ny ambaratonga lehibe. Maherin'ny 30 KG ny vokatra isam-bolana amin'ny vovoka maina mangatsiaka. Manana fahombiazana marin-toerana ny vokatra, miasa manokana amin'ny anzima avo lenta, ary tsy misy cytochrome mpampiantrano sy asidra nokleika. Tongasoa eto amin'ny fifandraisana amin'ny XD BIOCHEM Mahazoa fonosana fitsapana (Mailaka:sales@xdbiochem.comTel: +86 513 81163739).
Ireo vahaolana ara-teknika an'ny XD BIOCHEM dia ahitana
Amin'ny fampiasana fampidirana plasmid maro dika mitovy, dia voafantina ireo karazana fanehoana avo lenta miaraka amin'ny haavon'ny fanehoana 8g/L, izay mandresy ny olan'ny haavon'ny fanehoana ambany an'ny proteinase K.
Tamin'ny alalan'ny fametrahana dingana fanadiovana maro, dia nesorina tamim-pahombiazana ambanin'ny sanda mahazatra ny cytochrome mpampiantrano sy ny asidra nokleika sisa tavela amin'ny proteinase K.
Tamin'ny alalan'ny sivana avo lenta amin'ireo raikipohy buffer fiarovana, dia nofantenana ny buffer iray izay afaka mitahiry tsara ny proteinase K amin'ny 37°C.
Mandresy ny olana fa mora miangona sy mivaingana amin'ny fifantohana avo lenta ny "screening buffer", ary mametraka ny fototra ho an'ny fanamainana mangatsiaka be dia be an'ny proteinase K.
Santionan'ny XD BIOCHEM proteinase K
Fitsapana fahamarinan-toerana XD BIOCHEM proteinase K: tsy hisy fiovana lehibe eo amin'ny asa aorian'ny 80 andro amin'ny mari-pana ao an-trano
Fitsapana fahamarinan-toerana XD BIOCHEM proteinase K: tsy hisy fiovana lehibe eo amin'ny asa aorian'ny 80 andro amin'ny mari-pana ao an-trano.
Fampitahana ny vokatry ny fitrandrahana asidra nokleika an'ny XD BIOCHEM proteinase K sy ireo vokatra mifaninana. Mandritra ny dingan'ny fitrandrahana asidra nokleika, ny XD BIOCHEM sy ny proteinase K mifaninana no ampiasaina. Ny fahombiazan'ny fitrandrahana ny XD BIOCHEM proteinase K dia ambony kokoa ary ny sandan'ny Ct an'ny gène kendrena dia ambany kokoa.
Fotoana fandefasana: 31 Desambra 2021